反相液相色譜法分離和測定富馬酸
2011-11-03
[4702]
摘(zhai) 要 采用反(fan)相液相色譜法測(ce)定(ding)富(fu)馬酸。在μ-Bondapark C18色譜柱上以含0.5%乙酸的(de)水溶(rong)液作為流動相能較好地分(fen)離富馬酸和(he)馬來酸試樣，當(dang)其流速為1.0 mL/min時，富馬酸(suan)(suan)與(yu)馬來酸(suan)(suan)的分離因子的分離度達1.52。該(gai)方法(fa)操作簡便、快速(su)、定(ding)量準確、可靠。
1 引 言
富馬酸是一種重要的精細化工產品的原料。它可用于合成不飽和聚酯樹脂，它與醋酸乙烯的共聚物是良好的粘合劑，與(yu)苯乙烯(xi)的共聚(ju)物是(shi)制造玻璃鋼的材料(liao)；它也(ye)是(shi)一種食品添(tian)加劑（酸味(wei)劑），并可用于合成(cheng)新(xin)型(xing)防霉(mei)劑——霉克(ke)星。此外，它也(ye)是(shi)重要(yao)的醫藥原(yuan)料，如反丁(ding)烯二酸鐵用(yong)于(yu)冶療(liao)小紅血球(qiu)型貧血的富(fu)血鐵〔1〕。有(you)關(guan)其殘(can)留(liu)的分析測定國(guo)內(nei)外(wai)已(yi)有報道〔2～5〕，但(dan)有(you)關其工(gong)業生產的控制分析國內(nei)外尚未見報道。我們采用反(fan)相液相色譜法分離和(he)(he)測(ce)定工業產品(pin)中(zhong)(zhong)富(fu)馬(ma)(ma)酸含(han)量以及(ji)馬(ma)(ma)來(lai)(lai)酸樣(yang)品(pin)中(zhong)(zhong)富(fu)馬(ma)(ma)酸雜質(zhi)含(han)量。實驗結果表明，該方(fang)法(fa)*適(shi)合于(yu)工業產品(pin)中(zhong)(zhong)富(fu)馬(ma)(ma)酸的含(han)量的測(ce)定和(he)(he)馬(ma)(ma)來(lai)(lai)酸試樣(yang)中(zhong)(zhong)富(fu)馬(ma)(ma)酸雜質(zhi)的測(ce)定。
2 實驗部分
2.1 試劑和(he)儀器
Shimadzau LC-4A液相(xiang)色(se)譜儀；Waters 4801 液相(xiang)色譜光譜檢測儀；Waters 991二極管陣列檢測儀(yi)；Shimadzu C-R2A色譜數據處理儀；
富馬酸標準品：99%（浙江工(gong)(gong)業大學化(hua)工(gong)(gong)學院精細化(hua)工(gong)(gong)研究室）；馬來酸標準品：98%（浙江(jiang)工(gong)(gong)業大學化工(gong)(gong)學院精(jing)細(xi)化工(gong)(gong)研(yan)究室）；其(qi)它(ta)所用試劑(ji)均為分析純試劑(ji)。富馬酸(suan)及馬來酸(suan)樣(yang)品(pin)是由浙江(jiang)工(gong)(gong)業大學精(jing)細(xi)化工(gong)(gong)研(yan)究室提供的小(xiao)試合成樣(yang)品(pin)。
2.2 液相色(se)譜(pu)條(tiao)件
色譜(pu)柱： C18色(se)譜柱（30 cm×3.9 mm I.D）；流動相：含0.5%乙(yi)酸的水溶(rong)液；流速(su)：1.0 mL/min；檢(jian)測波(bo)長：240 nm（靈敏度為0.01 AU）。進樣量：20μL。
富馬酸是一種重要的精細化工產品的原料。它可用于合成不飽和聚酯樹脂，它與醋酸乙烯的共聚物是良好的粘合劑，與(yu)苯乙烯(xi)的共聚(ju)物是(shi)制造玻璃鋼的材料(liao)；它也(ye)是(shi)一種食品添(tian)加劑（酸味(wei)劑），并可用于合成(cheng)新(xin)型(xing)防霉(mei)劑——霉克(ke)星。此外，它也(ye)是(shi)重要(yao)的醫藥原(yuan)料，如反丁(ding)烯二酸鐵用(yong)于(yu)冶療(liao)小紅血球(qiu)型貧血的富(fu)血鐵〔1〕。有(you)關(guan)其殘(can)留(liu)的分析測定國(guo)內(nei)外(wai)已(yi)有報道〔2～5〕，但(dan)有(you)關其工(gong)業生產的控制分析國內(nei)外尚未見報道。我們采用反(fan)相液相色譜法分離和(he)(he)測(ce)定工業產品(pin)中(zhong)(zhong)富(fu)馬(ma)(ma)酸含(han)量以及(ji)馬(ma)(ma)來(lai)(lai)酸樣(yang)品(pin)中(zhong)(zhong)富(fu)馬(ma)(ma)酸雜質(zhi)含(han)量。實驗結果表明，該方(fang)法(fa)*適(shi)合于(yu)工業產品(pin)中(zhong)(zhong)富(fu)馬(ma)(ma)酸的含(han)量的測(ce)定和(he)(he)馬(ma)(ma)來(lai)(lai)酸試樣(yang)中(zhong)(zhong)富(fu)馬(ma)(ma)酸雜質(zhi)的測(ce)定。
2 實驗部分
2.1 試劑和(he)儀器
Shimadzau LC-4A液相(xiang)色(se)譜儀；Waters 4801 液相(xiang)色譜光譜檢測儀；Waters 991二極管陣列檢測儀(yi)；Shimadzu C-R2A色譜數據處理儀；
富馬酸標準品：99%（浙江工(gong)(gong)業大學化(hua)工(gong)(gong)學院精細化(hua)工(gong)(gong)研究室）；馬來酸標準品：98%（浙江(jiang)工(gong)(gong)業大學化工(gong)(gong)學院精(jing)細(xi)化工(gong)(gong)研(yan)究室）；其(qi)它(ta)所用試劑(ji)均為分析純試劑(ji)。富馬酸(suan)及馬來酸(suan)樣(yang)品(pin)是由浙江(jiang)工(gong)(gong)業大學精(jing)細(xi)化工(gong)(gong)研(yan)究室提供的小(xiao)試合成樣(yang)品(pin)。
2.2 液相色(se)譜(pu)條(tiao)件
色譜(pu)柱： C18色(se)譜柱（30 cm×3.9 mm I.D）；流動相：含0.5%乙(yi)酸的水溶(rong)液；流速(su)：1.0 mL/min；檢(jian)測波(bo)長：240 nm（靈敏度為0.01 AU）。進樣量：20μL。
為您提(ti)供。
在此操作條(tiao)件下，富馬(ma)酸和馬(ma)來酸樣(yang)品及其標準溶液的(de)色譜圖(tu)如圖(tu)1所(suo)示。
圖1 富(fu)馬(ma)酸試樣的色譜(pu)圖
Fig.1 Chromatogram of fumaric acid samples
a.富(fu)馬(ma)酸和馬(ma)來酸混合標準溶液（standard solution of fumaric acid and malic acid mixture）；b.富(fu)馬酸樣品（fumaric acid sample）；c.馬來(lai)酸樣品（malic acid sample）。1.馬(ma)來(lai)酸（malic acid）；2.富(fu)馬(ma)酸(suan)（fumaric acid）。
μ-Bondapark C18色譜柱（30 cm×3.9 mm I.D）。
2.3 標準溶液(ye)的(de)配制
準(zhun)確稱(cheng)取富馬酸標準(zhun)品約0.015 g（至±0.01 mg）置于10 mL容(rong)量瓶(ping)中(zhong)，用5 mL甲醇溶解并用流動相稀釋至刻度。然后逐步稀釋得不同濃度的標準溶液，其濃度分別為1.5×10-3，3.0×10-3，4.5×10-3，6.0×10-3，7.5×10-3，10.5×10-3，15.0×10-3 g/L。
2.4 樣品溶液的(de)配制
準確稱取(qu)一(yi)定量試(shi)樣（至(zhi)±0.01 mg）置(zhi)于10 mL容量瓶中，用5 mL甲醇溶(rong)解并用(yong)流動相(xiang)稀釋至刻度(du)。然后(hou)逐步稀釋至一定濃度(du)，待測定。
3 結果(guo)與討論(lun)
3.1 流動相選擇
作(zuo)者首先考察了不同流動相對試樣中富馬酸與其雜質的(de)分離效果，發現試樣在100%甲醇為(wei)流(liu)(liu)動(dong)相和以純水為(wei)流(liu)(liu)動(dong)相時試樣中(zhong)的(de)富馬酸(suan)及雜(za)質馬來酸(suan)等出(chu)峰較快，基(ji)本(ben)上(shang)與(yu)溶劑一起流(liu)(liu)出(chu)，而當流(liu)(liu)動(dong)相為(wei)含乙酸(suan)水溶液時富馬酸(suan)與(yu)馬來酸(suan)等之間具有較好(hao)的(de)分離效(xiao)果，而且流(liu)(liu)動(dong)相中(zhong)乙酸(suan)含量不同(tong)對其分離效(xiao)果產(chan)生明顯(xian)影響。
隨著乙酸(suan)濃度的增加(jia)，馬(ma)來酸(suan)的容量因子（k′1）隨之減少(shao)，而富(fu)馬酸的容量因子（k′2）先隨乙酸(suan)濃度(du)的增加而(er)增加，當乙酸(suan)濃度(du)＞1.0%時，其容量因子顯著(zhu)減(jian)少。從(cong)而使馬來酸(suan)與富馬酸(suan)之間的分離因子（α）和分(fen)離度(du)（R）在流動(dong)相中(zhong)乙(yi)酸濃度(du)為1.0%時(shi)，兩者均達(da)到zui大值，即α=2.02，R=2.32。同時考慮到色(se)譜柱的使用壽(shou)命，我們認為采用含0.5%乙酸水(shui)溶液(ye)為(wei)流動相較(jiao)為(wei)合適，因為(wei)當采(cai)用0.5%乙酸(suan)水溶液為流動相時，馬來酸(suan)與富馬酸(suan)之間的分(fen)(fen)離因子(zi)和(he)分(fen)(fen)離度分(fen)(fen)別達1.62和1.52，已滿足(zu)定量測定要求。
3.2 流(liu)速的影響(xiang)
實驗結果表(biao)明，當(dang)以含0.5%乙酸水(shui)溶液為流動相時，在(zai)室溫(wen)下改變其流速時(shi)，其保留(liu)時(shi)間、柱效均發生變化，即隨(sui)著(zhu)流速的降低，保留時間和柱(zhu)效隨(sui)之增加，而(er)容(rong)量因(yin)子(zi)（k′）基本(ben)不變。這是由于流速降低時，流動相中傳(chuan)質阻力(li)Hm、停滯流動相(xiang)中(zhong)傳質阻(zu)力Hsm和固定相內(nei)傳(chuan)質阻(zu)力Hs都降低，縱向分子(zi)擴散(san)雖有所增加，但在此(ci)濃(nong)度范圍內(nei)，前三項(xiang)的影響是主要(yao)的，后一項(xiang)可忽略。因(yin)此(ci)，流速降低，柱效增大。而容量因(yin)子(zi)（k′）是熱(re)力學參數(shu)，它(ta)與流(liu)(liu)動相的(de)(de)流(liu)(liu)速(su)無關，因(yin)(yin)此(ci)流(liu)(liu)動相的(de)(de)流(liu)(liu)速(su)的(de)(de)變化基本(ben)不影響馬來酸與富(fu)馬酸之(zhi)間的(de)(de)分離(li)因(yin)(yin)子，其α=1.57，流速選為1.0 mL/min。
3.3 檢測波長的選擇
富馬(ma)酸是一個不飽和(he)有機(ji)酸，它受(shou)紫外光的激(ji)發(fa)(fa)后可(ke)以發(fa)(fa)生σ→π*，π→π*，n→π*躍(yue)遷，因此(ci)它在紫外的短(duan)波區有(you)強烈的吸收(shou)，λmax,CH3OH=207 nm。實驗結果表明(ming)，在乙(yi)酸/水體(ti)系(xi)中富馬酸在λ=240 nm附近有強(qiang)吸收。
乙(yi)(yi)酸濃(nong)(nong)度(du)對富(fu)(fu)馬(ma)酸和馬(ma)來酸的紫外吸收帶(dai)有著明(ming)顯的影響，當乙(yi)(yi)酸濃(nong)(nong)度(du)增加時，富(fu)(fu)馬(ma)酸的zui大吸收波長(chang)顯著向長(chang)波方向位移，即產生紅移。當乙(yi)(yi)酸濃(nong)(nong)度(du)從0.5%增加(jia)到2.0%時，富馬酸(suan)的zui大吸(xi)收波長從236 nm位(wei)移至248 nm。并且，隨著(zhu)乙酸(suan)濃度(du)的增加，兩者的紫外吸收(shou)譜帶變狹。為此，選用0.5%乙(yi)酸溶液(ye)為(wei)(wei)流動相時，測定波長選擇為(wei)(wei)λ=240 nm。
3.4 溶劑的選(xuan)擇
實驗(yan)結果表明，試(shi)樣經甲醇溶解后采用不(bu)同溶劑稀釋(shi)，其色譜(pu)圖明顯不(bu)同，如用水稀釋(shi)時色譜(pu)圖中(zhong)產生一個(ge)較大的(de)(de)體(ti)系(xi)(xi)峰(feng)(feng)(feng)（負峰(feng)(feng)(feng)），而且該體(ti)系(xi)(xi)峰(feng)(feng)(feng)與(yu)馬來酸的(de)(de)色譜(pu)峰(feng)(feng)(feng)非常接近；而采用流動相(xiang)稀釋(shi)時，體(ti)系(xi)(xi)峰(feng)(feng)(feng)較小，使體(ti)系(xi)(xi)峰(feng)(feng)(feng)與(yu)馬來酸的(de)(de)峰(feng)(feng)(feng)*分離。因此(ci)，選擇流動相(xiang)作為稀釋(shi)溶劑。
3.5 方法(fa)的線(xian)性范圍和(he)檢測限
將不同濃度的標準(zhun)溶液在上述選定(ding)(ding)的色譜(pu)測(ce)定(ding)(ding)條件下分別(bie)進行分析測(ce)定(ding)(ding),進(jin)樣體積(ji)為20 μL。以濃度（C）為橫坐標(biao),峰面積（A）為縱坐標繪制標準曲線。實驗結(jie)果(guo)表明(ming),富馬(ma)酸的(de)濃度在2.4×10-3～12.2×10-3 g/L內，富馬酸(suan)的濃度與其峰面(mian)積呈現良好的線(xian)性(xing)關系,線性回歸(gui)方程為(wei)A=0.1933C+0.0452（r=0.9979）。方法的檢測限為7.7×10-2 mg/L（按信(xin)噪比2∶1）。
3.6 精(jing)密(mi)度(du)和準確度(du)
為了考察該方法(fa)的重(zhong)現性(xing),對同一試樣進行了5次重復(fu)測定的標準偏(pian)差為0.81,相對標準偏(pian)差(cha)為0.91%。
在已知(zhi)含量的樣品中加入一(yi)定(ding)(ding)量的標準品后(hou)進(jin)行多次測定(ding)(ding)。測得富馬酸的回收率為(wei) 98.86%～103.9%,平均回收(shou)率為101.0%。
表1 樣品(pin)中(zhong)富馬(ma)酸含量測定結果
Table 1 Determination results of concentration of fumaric acid in sample
樣(yang) 品
Sample 測定結果 Determination results （%） 平均值
Mean value （%）
1 2 3
馬來酸樣(yang)品 Malic acid sample 8.80 9.06 8.84 8.90
富馬酸(suan)樣(yang)品 Fumaric acid sample 88.74 87.50 87.96 88.07
3.7 實際樣品的(de)測定
該方法用于(yu)測定富馬(ma)酸(suan)和馬(ma)來酸(suan)樣品(pin)中富馬(ma)酸(suan)含(han)量，結果見表1。實驗結果表(biao)明，該(gai)方法(fa)*適合于富馬酸產(chan)品(pin)(pin)和馬來酸產(chan)品(pin)(pin)中富馬酸含量測(ce)定。
作者單(dan)位：施介華（浙江工(gong)業(ye)大(da)學(xue)化工(gong)學(xue)院，杭州(zhou) 310032）
徐秀珠（浙江大學分析(xi)測試中心，杭(hang)州(zhou) 310027）
References
［1］ Zhang Sigui（章思規），Xin Zhong（辛 忠）. Handbook of Preparation of Fine Organic Chemical Engineering（精細有機(ji)化(hua)工制(zhi)備手(shou)冊(ce)）. Beijing（北京）：Science and Technology ;Literature Press （科學(xue)技(ji)術文獻出版社），1994:386～387
［2］ Chen Dayi（陳大義(yi)）. Chinese J. Preventive Medicine（中華(hua)預(yu)防(fang)醫學雜(za)志），1996，30（1）：52
［3］ Yu Zhaolou（余兆樓），Chang Liwen（常理文）. Chinese J. Chromatogr.（色譜），1992，10（6）：336～338
［4］ Dietz E A, Singley K F. J. Liq. Chromatogr., 1994, 17（7）:1637～1651
［5］ Llorente M, Villaroya B, Gomez-Cordoves C. Chromatographia, 1991, 32（11／12）:555～558
在此操作條(tiao)件下，富馬(ma)酸和馬(ma)來酸樣(yang)品及其標準溶液的(de)色譜圖(tu)如圖(tu)1所(suo)示。
圖1 富(fu)馬(ma)酸試樣的色譜(pu)圖
Fig.1 Chromatogram of fumaric acid samples
a.富(fu)馬(ma)酸和馬(ma)來酸混合標準溶液（standard solution of fumaric acid and malic acid mixture）；b.富(fu)馬酸樣品（fumaric acid sample）；c.馬來(lai)酸樣品（malic acid sample）。1.馬(ma)來(lai)酸（malic acid）；2.富(fu)馬(ma)酸(suan)（fumaric acid）。
μ-Bondapark C18色譜柱（30 cm×3.9 mm I.D）。
2.3 標準溶液(ye)的(de)配制
準(zhun)確稱(cheng)取富馬酸標準(zhun)品約0.015 g（至±0.01 mg）置于10 mL容(rong)量瓶(ping)中(zhong)，用5 mL甲醇溶解并用流動相稀釋至刻度。然后逐步稀釋得不同濃度的標準溶液，其濃度分別為1.5×10-3，3.0×10-3，4.5×10-3，6.0×10-3，7.5×10-3，10.5×10-3，15.0×10-3 g/L。
2.4 樣品溶液的(de)配制
準確稱取(qu)一(yi)定量試(shi)樣（至(zhi)±0.01 mg）置(zhi)于10 mL容量瓶中，用5 mL甲醇溶(rong)解并用(yong)流動相(xiang)稀釋至刻度(du)。然后(hou)逐步稀釋至一定濃度(du)，待測定。
3 結果(guo)與討論(lun)
3.1 流動相選擇
作(zuo)者首先考察了不同流動相對試樣中富馬酸與其雜質的(de)分離效果，發現試樣在100%甲醇為(wei)流(liu)(liu)動(dong)相和以純水為(wei)流(liu)(liu)動(dong)相時試樣中(zhong)的(de)富馬酸(suan)及雜(za)質馬來酸(suan)等出(chu)峰較快，基(ji)本(ben)上(shang)與(yu)溶劑一起流(liu)(liu)出(chu)，而當流(liu)(liu)動(dong)相為(wei)含乙酸(suan)水溶液時富馬酸(suan)與(yu)馬來酸(suan)等之間具有較好(hao)的(de)分離效(xiao)果，而且流(liu)(liu)動(dong)相中(zhong)乙酸(suan)含量不同(tong)對其分離效(xiao)果產(chan)生明顯(xian)影響。
隨著乙酸(suan)濃度的增加(jia)，馬(ma)來酸(suan)的容量因子（k′1）隨之減少(shao)，而富(fu)馬酸的容量因子（k′2）先隨乙酸(suan)濃度(du)的增加而(er)增加，當乙酸(suan)濃度(du)＞1.0%時，其容量因子顯著(zhu)減(jian)少。從(cong)而使馬來酸(suan)與富馬酸(suan)之間的分離因子（α）和分(fen)離度(du)（R）在流動(dong)相中(zhong)乙(yi)酸濃度(du)為1.0%時(shi)，兩者均達(da)到zui大值，即α=2.02，R=2.32。同時考慮到色(se)譜柱的使用壽(shou)命，我們認為采用含0.5%乙酸水(shui)溶液(ye)為(wei)流動相較(jiao)為(wei)合適，因為(wei)當采(cai)用0.5%乙酸(suan)水溶液為流動相時，馬來酸(suan)與富馬酸(suan)之間的分(fen)(fen)離因子(zi)和(he)分(fen)(fen)離度分(fen)(fen)別達1.62和1.52，已滿足(zu)定量測定要求。
3.2 流(liu)速的影響(xiang)
實驗結果表(biao)明，當(dang)以含0.5%乙酸水(shui)溶液為流動相時，在(zai)室溫(wen)下改變其流速時(shi)，其保留(liu)時(shi)間、柱效均發生變化，即隨(sui)著(zhu)流速的降低，保留時間和柱(zhu)效隨(sui)之增加，而(er)容(rong)量因(yin)子(zi)（k′）基本(ben)不變。這是由于流速降低時，流動相中傳(chuan)質阻力(li)Hm、停滯流動相(xiang)中(zhong)傳質阻(zu)力Hsm和固定相內(nei)傳(chuan)質阻(zu)力Hs都降低，縱向分子(zi)擴散(san)雖有所增加，但在此(ci)濃(nong)度范圍內(nei)，前三項(xiang)的影響是主要(yao)的，后一項(xiang)可忽略。因(yin)此(ci)，流速降低，柱效增大。而容量因(yin)子(zi)（k′）是熱(re)力學參數(shu)，它(ta)與流(liu)(liu)動相的(de)(de)流(liu)(liu)速(su)無關，因(yin)(yin)此(ci)流(liu)(liu)動相的(de)(de)流(liu)(liu)速(su)的(de)(de)變化基本(ben)不影響馬來酸與富(fu)馬酸之(zhi)間的(de)(de)分離(li)因(yin)(yin)子，其α=1.57，流速選為1.0 mL/min。
3.3 檢測波長的選擇
富馬(ma)酸是一個不飽和(he)有機(ji)酸，它受(shou)紫外光的激(ji)發(fa)(fa)后可(ke)以發(fa)(fa)生σ→π*，π→π*，n→π*躍(yue)遷，因此(ci)它在紫外的短(duan)波區有(you)強烈的吸收(shou)，λmax,CH3OH=207 nm。實驗結果表明(ming)，在乙(yi)酸/水體(ti)系(xi)中富馬酸在λ=240 nm附近有強(qiang)吸收。
乙(yi)(yi)酸濃(nong)(nong)度(du)對富(fu)(fu)馬(ma)酸和馬(ma)來酸的紫外吸收帶(dai)有著明(ming)顯的影響，當乙(yi)(yi)酸濃(nong)(nong)度(du)增加時，富(fu)(fu)馬(ma)酸的zui大吸收波長(chang)顯著向長(chang)波方向位移，即產生紅移。當乙(yi)(yi)酸濃(nong)(nong)度(du)從0.5%增加(jia)到2.0%時，富馬酸(suan)的zui大吸(xi)收波長從236 nm位(wei)移至248 nm。并且，隨著(zhu)乙酸(suan)濃度(du)的增加，兩者的紫外吸收(shou)譜帶變狹。為此，選用0.5%乙(yi)酸溶液(ye)為(wei)(wei)流動相時，測定波長選擇為(wei)(wei)λ=240 nm。
3.4 溶劑的選(xuan)擇
實驗(yan)結果表明，試(shi)樣經甲醇溶解后采用不(bu)同溶劑稀釋(shi)，其色譜(pu)圖明顯不(bu)同，如用水稀釋(shi)時色譜(pu)圖中(zhong)產生一個(ge)較大的(de)(de)體(ti)系(xi)(xi)峰(feng)(feng)(feng)（負峰(feng)(feng)(feng)），而且該體(ti)系(xi)(xi)峰(feng)(feng)(feng)與(yu)馬來酸的(de)(de)色譜(pu)峰(feng)(feng)(feng)非常接近；而采用流動相(xiang)稀釋(shi)時，體(ti)系(xi)(xi)峰(feng)(feng)(feng)較小，使體(ti)系(xi)(xi)峰(feng)(feng)(feng)與(yu)馬來酸的(de)(de)峰(feng)(feng)(feng)*分離。因此(ci)，選擇流動相(xiang)作為稀釋(shi)溶劑。
3.5 方法(fa)的線(xian)性范圍和(he)檢測限
將不同濃度的標準(zhun)溶液在上述選定(ding)(ding)的色譜(pu)測(ce)定(ding)(ding)條件下分別(bie)進行分析測(ce)定(ding)(ding),進(jin)樣體積(ji)為20 μL。以濃度（C）為橫坐標(biao),峰面積（A）為縱坐標繪制標準曲線。實驗結(jie)果(guo)表明(ming),富馬(ma)酸的(de)濃度在2.4×10-3～12.2×10-3 g/L內，富馬酸(suan)的濃度與其峰面(mian)積呈現良好的線(xian)性(xing)關系,線性回歸(gui)方程為(wei)A=0.1933C+0.0452（r=0.9979）。方法的檢測限為7.7×10-2 mg/L（按信(xin)噪比2∶1）。
3.6 精(jing)密(mi)度(du)和準確度(du)
為了考察該方法(fa)的重(zhong)現性(xing),對同一試樣進行了5次重復(fu)測定的標準偏(pian)差為0.81,相對標準偏(pian)差(cha)為0.91%。
在已知(zhi)含量的樣品中加入一(yi)定(ding)(ding)量的標準品后(hou)進(jin)行多次測定(ding)(ding)。測得富馬酸的回收率為(wei) 98.86%～103.9%,平均回收(shou)率為101.0%。
表1 樣品(pin)中(zhong)富馬(ma)酸含量測定結果
Table 1 Determination results of concentration of fumaric acid in sample
樣(yang) 品
Sample 測定結果 Determination results （%） 平均值
Mean value （%）
1 2 3
馬來酸樣(yang)品 Malic acid sample 8.80 9.06 8.84 8.90
富馬酸(suan)樣(yang)品 Fumaric acid sample 88.74 87.50 87.96 88.07
3.7 實際樣品的(de)測定
該方法用于(yu)測定富馬(ma)酸(suan)和馬(ma)來酸(suan)樣品(pin)中富馬(ma)酸(suan)含(han)量，結果見表1。實驗結果表(biao)明，該(gai)方法(fa)*適合于富馬酸產(chan)品(pin)(pin)和馬來酸產(chan)品(pin)(pin)中富馬酸含量測(ce)定。
作者單(dan)位：施介華（浙江工(gong)業(ye)大(da)學(xue)化工(gong)學(xue)院，杭州(zhou) 310032）
徐秀珠（浙江大學分析(xi)測試中心，杭(hang)州(zhou) 310027）
References
［1］ Zhang Sigui（章思規），Xin Zhong（辛 忠）. Handbook of Preparation of Fine Organic Chemical Engineering（精細有機(ji)化(hua)工制(zhi)備手(shou)冊(ce)）. Beijing（北京）：Science and Technology ;Literature Press （科學(xue)技(ji)術文獻出版社），1994:386～387
［2］ Chen Dayi（陳大義(yi)）. Chinese J. Preventive Medicine（中華(hua)預(yu)防(fang)醫學雜(za)志），1996，30（1）：52
［3］ Yu Zhaolou（余兆樓），Chang Liwen（常理文）. Chinese J. Chromatogr.（色譜），1992，10（6）：336～338
［4］ Dietz E A, Singley K F. J. Liq. Chromatogr., 1994, 17（7）:1637～1651
［5］ Llorente M, Villaroya B, Gomez-Cordoves C. Chromatographia, 1991, 32（11／12）:555～558
- 上一篇：島津液相色譜儀的日常應用維護
- 下一篇：氣相色譜維修維護經驗
